Etude de la morphogenèse et de la voie de N-glycosylation chez la diatomée P. tricornutum

Résumé : La N-glycosylation est un événement co- et post-traductionnel majeur de la synthèse protéique chez les eucaryotes. Actuellement, peu d’informations concernant ce processus sont disponibles chez les microalgues. Dans ces travaux, nous avons poursuivi l’exploration de la voie de N-glycosylation de la diatomée modèle P. tricornutum en focalisant spécifiquement notre travail sur la caractérisation de trois α1,3-fucosyltransférases putatives. Nos analyses ont permis de remettre en cause l’annotation pour deux des gènes codant pour ces fucosyltransférases et d’en proposer de nouvelles. Afin de réaliser l’étude de la localisation subcellulaire de ces glycosyltransférases, nous avons utilisé une stratégie de sur-expression de ces protéines fusionnées avec une étiquette. Les observations menées par des approches de microscopie confocale et de microscopie électronique à transmission ont permises de mettre en évidence la localisation subcellulaire golgienne de ces enzymes, ainsi que de trois autres glycosyltransférases utilisées comme témoin dans ce travail. Cette étude a permis de réaliser la première localisation subcellulaire de glycosyltransférases chez les microalgues. P. tricornutum est une diatomée pléïomorphique qui possède trois morphotypes majeurs différents appelés ovale, fusiforme et triradié. Le passage d’un morphotype à un autre dépend fortement des conditions environnementales. Cependant, peu d’informations sont disponibles concernant les mécanismes et la signification physiologique de cette morphogenèse. Afin d’apporter de nouvelles réponses, nous avons réalisé une analyse comparative du transcriptome des trois morphotypes par une approche transcriptomique à haut débit appelée RNASeq pour RNA-Sequencing. Enfin, en plus d’élargir les connaissances sur la morphogénèse de P. tricornutum, les données générées ont également permis d’identifier de nouveaux gènes de référence utilisables pour des analyses de qRT-PCR.
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Contributeur : Arnaud Lehner <>
Soumis le : lundi 30 septembre 2019 - 18:13:08
Dernière modification le : mardi 1 octobre 2019 - 01:28:05

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Clément Ovide. Etude de la morphogenèse et de la voie de N-glycosylation chez la diatomée P. tricornutum. Biochimie, Biologie Moléculaire. Université de Rouen Normandie, 2016. Français. ⟨tel-02301887⟩

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