Détection des anomalies du cycle cellulaire et diagnostic multiparamétrique de la Néoplasie Transmissible des Bivalves par cytométrie en flux chez la moule Mytilus sp.
Abstract
Les néoplasies transmissibles sont des pathologies rarissimes touchant exclusivement
deux groupes de mammifères (chiens et Diable de Tasmanie) et certains bivalves marins. La
Néoplasie Transmissible des Bivalves (NTB) est une maladie pseudo-leucémique fatale à
progression lente, disséminée par l'eau de mer. La NTB est soupçonnée d’être l’une des causes
des épisodes de mortalité observés dans les conchylicultures.
Nous proposons ici une méthode de diagnostic de la NTB chez la moule Mytilus sp à
partir d'analyses multiparamétriques de prélèvements d'hémolymphe par cytométrie en flux.
Cette méthode a été appliquée afin de d'estimer la prévalence de la maladie entre octobre
2017 et mars 2018 au sein de moulières naturelles ou exploitées. Les paramètres
hémocytaires (numération, formule et viabilité), la capacité phagocytaire et l'ADN-ploïdie par
mesure de l'indice d'ADN sur noyaux isolés ont été déterminés. Une méthode d'analyse
poussée a permis d'écarter les faux positifs sur le critère néoplasie.
Très majoritairement, les moules présentent uniquement des populations hémocytaires
euploïdes avec un cycle cellulaire normal doté des trois phases G0/G1 (2N), S et G2/M (4N),
indiquant la présence d'une faible proportion de cellules mitotiques en circulation dans
l'hémolymphe. Cependant, des individus se caractérisent par l’apparition d’un autre pic
correspondant à des cellules singulièrement aneuploïdes (10N), signant la présence d'une
population pseudo-clonale d'hémocytes présentant une forte instabilité génomique ou
chromosomique. Le pourcentage des cellules aneuploïdes permet l’identification de différents
stades de la maladie (précoce ou avancé) chez les individus, avec une valeur pronostique sans
doute intéressante mais restant à évaluer. L’analyse cytométrique, l’observation
microscopique des cellules et l’analyse de la phagocytose ont montré que les cellules
néoplasiques correspondent à des hyalinocytes de grande taille, de forme ronde présentant
un noyau hypertrophié, ainsi qu’une perte de leur pouvoir d'ancrage et une diminution de leur
activité phagocytaire. En conclusion, cette étude documente avec précision les
caractéristiques des cellules néoplasiques et propose une méthode rapide et sensible pour
l’identification et la caractérisation de la NTB chez les bivalves marins.